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掌握這些,一體化免疫熒光技術(shù)不用愁
免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術(shù),是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合,利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞【詳細(xì)】
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蛋白質(zhì)印跡法中為什么檢測不到目的蛋白?
很多小伙伴在對膠片印跡進(jìn)行短暫曝光后,檢測不到目的蛋白。可從以下幾個方面來優(yōu)化實(shí)驗(yàn)步驟:1、裂解物制備每道全細(xì)胞提取物的20–30?g總蛋白,通常足夠用來檢測。如果靶標(biāo)蛋白的基礎(chǔ)水平,或蛋白質(zhì)修飾程度低,可能需要通過化學(xué)刺激劑來誘導(dǎo)表達(dá)或修飾。你【詳細(xì)】
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數(shù)字PCR結(jié)果一定準(zhǔn)確嗎?
數(shù)字PCR是繼實(shí)時熒光定量PCR之后新興的一種核酸絕對定量分析技能。經(jīng)過將含有樣本的數(shù)字PCR反響液渙散到不計其數(shù)個獨(dú)立的微單元中,在PCR擴(kuò)增后對每個微單元中的熒光信號進(jìn)行判讀,計算出陰性和陽性的數(shù)量,蕞終利用泊松分布等統(tǒng)計學(xué)公式和軟件對結(jié)果進(jìn)行計算【詳細(xì)】
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病毒轉(zhuǎn)染原理及步驟 古朵實(shí)驗(yàn)√
在細(xì)胞相關(guān)的實(shí)驗(yàn)操作中,對于一些按常規(guī)方法難以轉(zhuǎn)染甚至無法轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,通過病毒介導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)?zāi)軌虼蟠筇岣呋虻霓D(zhuǎn)導(dǎo)效率,以達(dá)到目的基因的高效瞬時表達(dá)。病毒轉(zhuǎn)染包括以下步驟:1構(gòu)建載體2包裝提純病毒3感染靶細(xì)胞。以慢病毒為例。慢病毒(Lentivirus)載【詳細(xì)】
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蛋白質(zhì)凝膠電泳凝膠的制備方法
【材料與試劑】(1)30%的丙烯-酰胺:分別稱取29g丙烯-酰胺,1gN,N-亞甲雙丙烯-酰胺加溫?zé)岬娜ルx子水60ml,加熱至37℃溶解,補(bǔ)加水至終體積為100ml,過濾,即配成30%(w/v)丙烯-酰胺貯存溶液。丙烯-酰胺和雙丙烯-酰胺在貯存過程中緩慢轉(zhuǎn)變?yōu)楸┧岷碗p丙烯酸【詳細(xì)】
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Western Blot 蛋白樣品制備
做WB之前,蛋白質(zhì)的提取至關(guān)重要,成也提取敗也提取。現(xiàn)在開講;一、單層貼壁細(xì)胞總蛋白的提取:1.倒掉培養(yǎng)液,并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養(yǎng)液(或?qū)⑵恐绷⒎胖靡粫菏箽堄嗯囵B(yǎng)液流到瓶底然后再用移液器將其吸走)。2.每瓶細(xì)胞加3ml4℃預(yù)冷的PBS(0.【詳細(xì)】
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為什么要對胎牛血清內(nèi)毒素格外留意
養(yǎng)過細(xì)胞的童鞋大都有著這樣的共識:血清,由于其復(fù)雜的內(nèi)在成分和難以控制的外界因素,它既是細(xì)胞生長的必-備營養(yǎng),也是細(xì)胞死亡的致命“毒-藥”,古朵生物為您分析為什么要對胎牛血清內(nèi)毒素格外留意。有下列情況者,對胎牛血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選:1.養(yǎng)干【詳細(xì)】
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細(xì)胞凋亡與細(xì)胞焦亡到底怎么回事?
細(xì)胞凋亡和細(xì)胞焦亡的比較1、概念(1)細(xì)胞焦亡(Pyroptosis)細(xì)胞焦亡是一種炎癥程序性細(xì)胞死亡,由各種病理刺激引發(fā),如中風(fēng)、心臟病發(fā)作、癌癥、微生物感染等。其它已知類型的程序性細(xì)胞死亡包括凋亡和壞死。研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞焦亡依賴于caspase-1,這從根本【詳細(xì)】
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蛋白質(zhì)純度分析方法介紹
在評價樣品純度之前,首-先需要鑒定待測雜質(zhì)的類型,如核酸、碳水化合物、脂質(zhì)、無關(guān)蛋白質(zhì)、同工酶類、失活蛋白質(zhì),進(jìn)而確定在特定溶液條件中,能夠區(qū)分假定雜質(zhì)和目標(biāo)蛋白質(zhì)的理化特性(化學(xué)分析或物理特征)。而純度則是指待測雜質(zhì)含量低于某個特定水平。需【詳細(xì)】
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封閉血清的使用以及原理了解一下!
做免疫組化時,一般都會封閉。以減少假陽性。封閉主要是用于封去切片上一些非特異性吸附。用一種非特異性的蛋白,把那些容易吸附蛋白的空間和位點(diǎn)占起來,這樣,加上抗體時,抗體只能與對應(yīng)的抗原去結(jié)合了。一般封閉可以用5%的BSA,這個價格便宜,而且效果還【詳細(xì)】
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胰蛋白胨與蛋白胨的區(qū)別
蛋白胨是一種外觀呈淡黃色的粉劑,具有肉香的特殊氣息。它作為微生物培養(yǎng)基的主要原料,在抗生素,醫(yī)藥工業(yè),發(fā)酵工業(yè),生化制品及微生物學(xué)科研等領(lǐng)域中的用量均很大;不同的生物體需要特定的氨基酸和多肽,因此存在各種蛋白胨,一般來說,用于蛋白胨生產(chǎn)的蛋【詳細(xì)】
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醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則
醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室是一個病原微生物高度集中的場所,其實(shí)驗(yàn)對象大都是病原微生物,有傳染的危險。為了防止病原微生物感染自身、污染環(huán)境以及擴(kuò)散傳播,要求同學(xué)們進(jìn)入微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室必須嚴(yán)格遵守以下規(guī)則:一、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須先穿本室的實(shí)驗(yàn)服,必要的實(shí)驗(yàn)指【詳細(xì)】
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科研人一定要了解的抗體保存方法!
抗體由于性質(zhì)和所使用的儲存條件等各有不同,其保質(zhì)期可能從幾周到幾年。抗體能否正確保存,直接決定了抗體的活性和使用效果。每個抗體有其*的保存蕞佳條件,但我們依然可以總結(jié)抗體保存的一般準(zhǔn)則以及一些注意事項(xiàng)。抗體必須存放在適當(dāng)?shù)臏囟群蚿H值范圍。為【詳細(xì)】
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蛋白質(zhì)組和蛋白質(zhì)組學(xué)分析
隨著人類基因組計劃研究成果的公布,人們對基因的認(rèn)識逐漸清晰,但基因數(shù)量的有限性和基因結(jié)構(gòu)的相對穩(wěn)定性,與生命現(xiàn)象的復(fù)雜性和多樣性之間存在巨大反差。如何了解眾多的基因與危害人類身心健康的疾病之間的關(guān)系,對生命科學(xué)研究者來說仍是一項(xiàng)長期而艱巨的【詳細(xì)】
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常用細(xì)菌培養(yǎng)基制備及注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)方法原理培養(yǎng)基是人工合成的一種混合營養(yǎng)料,用于分離培養(yǎng)細(xì)菌。常用的有基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基等。試劑、試劑盒牛肉/膏蛋白胨氯化鈉蒸餾水瓊脂NaOH酚紅指示劑儀器、耗材pH試紙三角燒瓶量筒天平吸管實(shí)驗(yàn)步驟1.稱取牛肉/膏3g,蛋【詳細(xì)】
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凝膠過濾實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
1.層析柱的選擇層析柱大小主要是根據(jù)樣品量的多少以及對分辨率的要求來進(jìn)行選擇。一般來講,主要是層析柱的長度對分辨率影響較大,長的層析柱分辨率要比短的高;但層析柱長度不能過長,否則會引起柱子不均一、流速過慢等實(shí)驗(yàn)上的一些困難。一般柱長度不超過10【詳細(xì)】
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蕞小抑菌濃度(MIC)及抑菌率的測定
提純蛋白質(zhì)后,需要測定其最小抑菌濃度(MIC),有文獻(xiàn)提到根據(jù)MIC測得的結(jié)果計算抑菌率:抑菌率(%)=(陽性對照OD值—試驗(yàn)OD值)/(陽性對照OD值—陰性對照OD值)X100樣品的MIC與同性質(zhì)藥物和一些常用藥物的MIC進(jìn)行比較才有意義,不能單純通過自己樣品的結(jié)果就【詳細(xì)】
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胎牛血清于細(xì)胞提供哪些益處?
眾所周知胎牛血清是現(xiàn)如今市面上培養(yǎng)細(xì)胞的有效物質(zhì),這是由于這種專-業(yè)的天然提取物中含有大量的營養(yǎng),能夠有效地保證細(xì)胞的生長。胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用必-備的添加培養(yǎng)基。它營養(yǎng)豐富,大約含有三四百種不同成分,具有基礎(chǔ)培養(yǎng)基所不具備的營養(yǎng)因子。胎【詳細(xì)】
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如何辨別胎牛血清的質(zhì)量?
胎牛血清是當(dāng)前細(xì)胞培養(yǎng)用量蕞大的天然培養(yǎng)基,因其不可替代性胎牛血清的質(zhì)量好壞關(guān)系到培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的成敗與否。那么胎牛血清地位如此重要如何才能保障品質(zhì)呢?1.內(nèi)毒素內(nèi)毒素含量越低的血清,胎牛血清級別就越高:內(nèi)毒素≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;10E【詳細(xì)】
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微生物菌種功效解析!
各種菌種對作物的影響一、枯草芽孢桿菌:增加作物抗逆性、固氮。二、巨大芽孢桿菌:解磷(磷細(xì)菌),具有很好的降解土壤中有機(jī)磷的功效。三、膠凍樣芽孢桿菌:解鉀,釋放出可溶磷鉀元素及鈣、硫、鎂、鐵、鋅、鉬、錳等中微量元素。四、地衣芽孢桿菌:抗病、殺【詳細(xì)】
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