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單染色一般要經過涂片、固定、染色、水洗和干燥五個步驟。

　　染色結果依染料不同而不同：

　　石碳酸復紅染色液：著色快，時間短，菌體呈紅色。　　

　　美蘭染色液：著色慢，時間長，效果清晰，菌體呈蘭色。

　　草酸銨結晶染色液：染色迅速，著色深，菌體呈紫色。

革蘭氏染色法

　　革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，1884年由丹麥醫師Gram創立。

　　細菌先經堿性染料結晶染色，而經石典液媒染后，用酒精脫色，在一定條件下有的細菌此色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽性菌（G+），后者為革蘭氏陰性菌（G—）。為觀察方便，脫色后再用一種紅色染料如堿性蕃紅等進行復染。陽性菌仍帶紫色，陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和絕大多數和球菌，以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏正反應；弧菌，螺旋體和大多數致病性的無芽胞桿菌都呈現負反應。

　　革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在化學組成和生里性質上有很多差別，染色反應不一樣。現在一般認為革蘭氏陽性菌體內含有特殊的核蛋白質鎂鹽與多糖的復合物，它與石典和結晶紫的復合物結合很牢，不易脫色，陰性菌復合物結合程度底，吸附染料差，易脫色，這是染色反應的主要依據。