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霉菌和酵母的測試片檢測方法       方法編號：5031

 1 適用范圍：本品可用于各類食品及飲用水中霉菌和酵母菌的計數。

2 方法原理：將霉菌營養培養基、吸水凝膠和酶顯色劑加載在紙片上，通過培養，在酶顯色劑的放大作用下，使霉菌和酵母菌在紙片上顯現出出來，通過計數報告結果。

3方法特點：與傳統方法相比，省去了配制培養基、消毒和培養器皿的清洗處理等大量輔助性工作，即開即用，操作簡便。培養時間由一周縮短為48h～72h。

4 操作方法

4.1樣品處理：無菌稱取樣品25g（或25mL）放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質杯內，經充分振搖做成1:10的稀釋液，用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌水的試管內，用1mL滅菌吸管反復吸吹50次做成1:100的稀釋液，以此類推，每個稀釋度更換一支滅菌吸管。

4.2接種：

4．2．1一般食品選2～3個稀釋度進行檢測，含菌量少的液體樣品（如食用純水和礦泉水等）可直接用原液檢測。將檢驗紙片水平放臺面上，揭開上面的透明薄膜，用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL，均勻加到中央的濾紙片上，然后輕輕將上蓋膜放下，靜置5min，每個稀釋度接種兩片。

4.2．2用手指先沿方格區邊緣刮一下，防止水外流，然后再在中間輕輕推刮，使水分在紙片方格區內均勻分布，并將氣泡趕走。

4．3培養：將加了樣的檢驗紙片每12片疊放在一起，放入自封袋中，平放在28℃培養箱內培養48h開始觀察計數。

4.4結果判斷與計數：霉菌和酵母菌在紙片上生長后會顯示藍色斑點，霉菌菌落顯示的斑點略大或有點擴散，酵母菌落則較小而圓滑，許多霉菌在培養后期全呈現其本身*的顏色。選擇菌落數適中（10～50個）的紙片進行計數，乘以稀釋倍數后即為每克（或毫升）樣品中霉菌和酵母菌的數目。

5 計數原則及報告方式：

5.1 通常選擇菌落在10～50個之間的紙片進行計數，乘以稀釋倍數報告之。

5.2具體計數原則可參照細菌（菌落）總數的測定方法進行。

6 附加說明：由于霉菌常以孢子的形式于空氣中到處傳播，而多種樣品是要求霉菌酵母菌不得撿出，因此檢測霉菌時需特別小心操作，取樣用品、稀釋用水和吸管吸頭等都需仔細消毒，接種時盡量避免空氣流動，動作要干凈利落，每次用滅菌生理鹽水接一片空白對照，以免出現假陽性結果。