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上海信裕生物科技有限公司
主營產品： ELISA試劑盒，檢測試劑盒，白介素試劑盒，試劑盒，重組蛋白，單克隆抗體，多克隆抗體，細胞系，原代細胞，胎牛血清，生化試劑，實驗室耗材，abcam抗體等科研產品 |
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更新時間：2016-09-13 14:52:36瀏覽次數：355
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人血管活性腸肽檢測試劑盒生產廠家會提供對數坐標紙，可直接手工繪制曲線；如果酶標儀帶有分析軟件，可由軟件直接擬合曲線，并自動計算出樣本的濃度值；老式的酶標儀只能打印出OD值，需要實驗員自己繪制曲線并計算，下面介紹2種繪制競爭法曲線的方法，希望對大家有幫助：
一、在對數坐標紙上手工繪制曲線（Log-logit雙對數標準曲線）
1. 實驗做雙孔，實驗結果如下表所示。
標準點 濃度 OD1 OD2 OD均 結合率
S0 0 2.226 2.192 2.209
S1 0.1 1.725 1.679 1.702 77.0%
S2 0.4 1.313 1.338 1.3255 60.0%
S3 1.6 0.907 0.834 0.8705 39.4%
S4 6.4 0.517 0.517 0.517 23.4%
S5 25.6 0.230 0.244 0.237 10.7%
2）各標準點吸光值取均值。在表中OD均一列。
3）將S1~S5的OD均值與S0的OD均相除，為標準點的百分結合率。
4）在log-logit坐標紙上繪圖。
5）坐標紙上橫軸從左至右*個1-9表示為*個10進位，第二個1-9表示為第二個10進位。第三個1-9表示為第三個10進位。也就是說，如果*個1代表1ng/ml，則第二個1代表10ng/ml，第三個1代表100ng/ml。因為本次實驗標準曲線范圍是從0.1ng/ml到25.6ng/ml，則可以用*個1代表0.1ng/ml，第二個1代表1ng/ml，第三個1代表10ng/ml。
6）坐標紙縱軸為百分比。即各標準吸光值的百分結合率。
7）曲線*個數值點是（0.1，77.0%）。則在橫軸左起點的1處向上至70~80之間，由70向上7個小格處。
8）曲線第二個數值點是（0.4，60.0%）。則在橫軸左起*個4，向上至60的位置。
9）曲線第三個數值點是（1.6，39.4%）。則在橫軸左起第二個1至2之間，由第二個1向右6個小格。再向上至30~40之間，由30向上9個半小格處。
10）曲線第四個數值點是（6.4，23.4%）。則在橫軸左起第二個6至7之間，這里6與7之間分為5小格，則每個小格是0.2。所以由第二個6向右2個小格。再向上至20~30之間，由20向上約3個半小格處。
11）曲線第四個數值點是（25.6，10.7%）。則在橫軸左起第三個2至3之間，這里2與3之間分為10小格，則每個小格是1。所以由第三個2向右5個半小格。再向上至10~20之間，由10向上約半小格處。
12)畫一條通過各點的直線。要求盡可能多的點在線上，同時剩余的點均勻分布在直線的兩邊。
13）樣品也同樣由吸光值計算百分結合率，再從縱軸上的相應結合率找到直線上的點，此點對應的橫坐標濃度即為樣品的濃度。無須換算。
