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上海信裕生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： ELISA試劑盒，檢測(cè)試劑盒，白介素試劑盒，試劑盒，重組蛋白，單克隆抗體，多克隆抗體，細(xì)胞系，原代細(xì)胞，胎牛血清，生化試劑，實(shí)驗(yàn)室耗材，abcam抗體等科研產(chǎn)品 |
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更新時(shí)間：2016-09-08 14:52:38瀏覽次數(shù)：59
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人促紅細(xì)胞生成素檢測(cè)試劑盒檢測(cè)時(shí)的問題：
1.為什么標(biāo)準(zhǔn)品的OD值會(huì)是上圖的結(jié)果？真的是想不出來為什么會(huì)這樣呀？
答：你的標(biāo)準(zhǔn)品除了標(biāo)4中有一孔偏低至0.622外，其余幾乎無任何線性，實(shí)際上我懷疑你的標(biāo)40.622這孔做的有問題，真實(shí)的結(jié)果應(yīng)該是全部標(biāo)準(zhǔn)曲線OD值都應(yīng)該在1.5—2.0左右波動(dòng)，試劑盒的標(biāo)曲可看出有明顯的線性關(guān)系：
2.人促紅細(xì)胞生成素檢測(cè)試劑盒雖然待測(cè)樣品3個(gè)復(fù)孔間差異不是很大，但我們也可以看到所有的待測(cè)樣品OD值差異也不是很大，其中樣9和樣10為正常人尿標(biāo)本，其值也很大，所以，想請(qǐng)問一下，這種現(xiàn)象正常嗎？
答：血管緊張素原正常人和病人之間是否有差異，*取決于血管緊張素原這個(gè)指標(biāo)與某種疾病之間特異性、敏感性怎么樣，如果大量的文獻(xiàn)顯示正常組與患病組間存在顯著差異，那我認(rèn)為你這個(gè)結(jié)果不正常。我之前提示過你：“在看定量的試劑盒至少要有一個(gè)0點(diǎn)吧畢竟它代表了試劑盒包被抗體和酶標(biāo)抗體的交叉反應(yīng)情況（也就是試劑盒的背景），樣本定值時(shí)至少要減去0點(diǎn)在定量吧，可使你的試劑盒只有一個(gè)空白孔（不加酶標(biāo)試劑）只能算作顯色液的背景”如果你上圖結(jié)果中的空白孔還是不加酶標(biāo)試劑的話，我懷疑你的試劑盒酶標(biāo)試劑和板有交叉反應(yīng)，你所有的樣本OD值可能都是你試劑盒交叉反應(yīng)的結(jié)果，你可以用純化水或試劑盒中的樣稀（里面肯定不含有血管緊張素原）當(dāng)做樣本進(jìn)行加樣，洗板后加酶，zui終看看OD值是多少！
3.加入終止液后，有的孔的顏色沒有立即由藍(lán)色變?yōu)辄S色（比如前邊的標(biāo)準(zhǔn)孔，但隨著加后邊的樣，前邊的孔就會(huì)*變成黃色。），所以，后邊的孔加了終止液之后，如果沒有*變?yōu)辄S色，此時(shí)，我應(yīng)該立即測(cè)OD值呢？還是應(yīng)該等全都變黃色之后再測(cè)呢？
答：顏色沒有立即變藍(lán)的原因可能是終止液的酸度不是太強(qiáng)，這個(gè)跟試劑盒有關(guān)系，你不用管，必須等到全部變成黃色才能讀值，因?yàn)?/span>OD450nm，就是對(duì)黃色有zui大吸收。
4.由上圖可以看到，雖然都在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)測(cè)得OD值，同一孔的數(shù)值也發(fā)生生了變化，有的孔變大了，有的孔變小了，這是什么原因造成的呢？我該以哪一次的數(shù)值為準(zhǔn)呢？
答：多樣本的OD值*次測(cè)定高、第二次低、第三次又再次高上去說明你的酶標(biāo)儀這個(gè)儀器本身的變異有點(diǎn)大，其實(shí)以那一次的結(jié)果都可以，因?yàn)槿绻呛细竦脑噭┖?，即?/span>OD值有所變化，但是不同組間的差異一定還是能看出來的。
