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果糖fructose 含量檢測試劑盒資料
閱讀:290 發布時間:2018-9-26For Research Use Only
僅供研究用
貨號:QYS-234052
果糖(fructose ,FT)含量試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:
果糖是一種zui為常見的己酮糖,是葡萄糖的同分異構體,以游離狀態大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中,能與葡萄糖結合生成蔗糖。果糖是zui甜的單糖,廣泛應用于食品、醫藥、保健品生產中。
果糖(fructose ,FT)含量試劑盒說明書測定原理:
在酸性條件下果糖與*反應,生成有色物質,在 480nm 下有特征吸收峰。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、蒸餾水
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100ml×1 瓶,4℃保存;
試劑一:1mg/mL 標準液 10mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 40ml×1 瓶,4℃保存;
試劑三:液體 15ml×1 瓶, 4℃保存;
試劑四:粉劑 0.5g×1 瓶,常溫保存。
果糖提取:
稱取 0.1~0.2g 樣本,常溫研碎;加入 1mL 提取液,適當研磨后快速轉移到有蓋離心管中;置于 80℃水浴鍋中 10min(蓋緊,以防止水分散失),振蕩 3~5 次,冷卻后,4000g,25℃離心 10min,取上清;加入少量(約 2mg)試劑四,80℃脫色 30min(蓋緊,以防止水分散失);再加入 1mL 提取液,4000g,25℃離心 10min,取上清液測定。
果糖(fructose ,FT)含量試劑盒說明書測定步驟:
1、 分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 480nm,蒸餾水調零。
2、樣本測定(在 1.5mL EP 管中依次加入下列試劑):
試劑(μL) 空白管 標準管 測定管
樣本 100
試劑一 100
蒸餾水 100
試劑二 700 700 700
試劑三 200 200 200
混勻,95℃水浴反應 30min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻后測定 480nm 處光吸收值,空白管、標準管和測定管分別記為 A1、A2 和 A3。
果糖含量計算:
1、果糖含量(mg/mg prot)=(C 標準管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷
(A2-A1) ÷Cpr
果糖(fructose ,FT)含量試劑盒說明書此法需要自行測定蛋白濃度。
2、果糖含量(mg/g 鮮重)=(C 標準管×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= 2× (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。
C 標準管:標準管濃度,1mg/mL;V1:加入樣本體積,0.1mL;V2:加入提取液體積,2mL;
Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。
注意:zui低檢測限為 100ng/g 鮮重或 1ng/mg prot