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Clarke固定液實驗步驟
閱讀:85 發布時間:2021-9-24提 供 商 | 上海古朵生物科技有限公司 | 資料大小 | 17.2KB |
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資料圖片 | 下載次數 | 39次 | |
資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數 | 85次 |
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產品名稱:Clarke固定液
分類:固定液
規格:500ml
儲存條件:室溫,12個月
用途:無水固定液,常用于HE的染色固定,可以保護核酸。
注意事項:主要由乙醇、冰乙酸組成。
產品簡介:
固定的目的在于保存細胞和組織的原有形態結構,固定劑能阻止內源性溶酶體酶對自身組織和細胞的自溶、抑制細菌和霉菌的生長。固定劑通過凝固、生成添加化合物等使蛋白質內部結構發生改變,從而使酶失活。未固定前活細胞被包裹在不能穿透的膜內,固定劑能夠破壞這一屏障,使大分子物質穿透膜、逸出。選擇固定液對組織染色和免疫組化染色都極其重要,通常將幾種固定劑混合配制成復合固定液,這樣可以適應多種組織、細胞成分的保存,然而目前還沒有一種標準的固定液適用于所有的組織、細胞成分的保存。固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。
固定液(Clarke Fluid)又稱Clarke溶液,主要乙醇 、乙酸混合而成,固定后對于HE染色有較好的組織學形態。其優點是可以保護核酸,其缺點是①易脫去油脂,因此不適宜脂肪染色的固定;②適用于短期固定,并且固定后應將組織移到95%中。
操作步驟(僅供參考):
按實驗具體要求操作。一般僅需固定30~60min。如果組織塊大,可適當延長固定時間,但不宜超過24h。固定后,應將組織移到95%中。
注意事項:
1. 組織取材的厚度不同,固定時間也不同,對組織恰當的選材有利于固定液的滲透。
2. 固定液的容量應足夠,一般固定液與組織塊的體積比率應大于10:1。如果容積不夠大,可以在固定期間更換1~3次固定液。
3. 取出新鮮組織后,應及時固定,無法及時固定時,應保存于生理鹽水中及時送檢。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。