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Lillie二價(jià)鐵染色液操作注意事項(xiàng)
閱讀:64 發(fā)布時(shí)間:2021-8-9提 供 商 | 上海古朵生物科技有限公司 | 資料大小 | 17.3KB |
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中文名稱(chēng):Lillie二價(jià)鐵染色液
產(chǎn)品規(guī)格:2×50mL|2×100mL
用途:顯示組織中的三價(jià)鐵離子
注意事項(xiàng):三價(jià)鐵呈深普魯士藍(lán),細(xì)胞核呈紅色。
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月
產(chǎn)品概述:
含鐵血黃素(Hemosiderin)是一種血紅蛋白源性色素,為金黃色或棕黃色顆粒,因其含鐵,且為金黃色,故稱(chēng)為含鐵血黃素。當(dāng)紅細(xì)胞被巨噬細(xì)胞吞噬后,在溶酶體酶的作用下,血紅蛋白被分解為不含鐵的橙色血質(zhì)和含鐵的含鐵血黃素。Perls普魯士藍(lán)反應(yīng)(Prussian blue reaction)又稱(chēng)為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過(guò)亞鐵qing化鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍(lán)色,常見(jiàn)于吞噬細(xì)胞或間質(zhì)內(nèi),主要顯示三價(jià)鐵鹽。在極少數(shù)情況下,鐵存在于其還原態(tài)的亞鐵之中,Lillie法是顯示二價(jià)鐵的很好地的方法,其特異性較好。
自備材料:
1、系列乙醇
2、蒸餾水
操作步驟(僅供參考):
1、 組織固定于中性福爾馬林或其他堿性固定液,常規(guī)脫水包埋。
2、 切片厚度,常規(guī)脫蠟至水。
3、 蒸餾水水洗。
4、 切片入Lillie stain (見(jiàn)注意事項(xiàng)4),浸染。
5、 蒸餾水充分沖洗。
6、 入核固紅染色液,淡染細(xì)胞核。
7、 蒸餾水沖洗。
8、 常規(guī)脫水透明,中性樹(shù)膠封固
染色結(jié)果:
二價(jià)鐵 深藤氏藍(lán)
細(xì)胞核、其他組織 紅色
陰性對(duì)照(可選):取相同對(duì)照切片脫蠟至水。結(jié)果為陰性。
注意事項(xiàng):
1、 該染色法適用于石蠟切片、冰凍切片和樹(shù)脂切片,切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。
2、 組織固定常采用10%中性福爾馬林,經(jīng)普通福爾馬林長(zhǎng)期固定后,組織會(huì)有損傷。避免使用酸性固定劑,鉻酸鹽處理也會(huì)妨礙鐵的保存。
3、 整個(gè)操作過(guò)程中容器要干凈,避免用金屬鐵制品,洗切片和容器時(shí)以蒸餾水為宜,因普通水內(nèi)含鐵質(zhì)。
4、 Lillie stain染色時(shí),應(yīng)根據(jù)樣本情況調(diào)整著色時(shí)間。
5、 所有切片都應(yīng)使用同一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照切片,選擇適合的對(duì)照非常重要。尸檢肺組織是一個(gè)很好的對(duì)照,包含相當(dāng)數(shù)量的鐵陽(yáng)性巨噬細(xì)胞(心衰細(xì)胞)。
6、 系列乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液。
7、 冰凍切片和細(xì)胞的染色,最好根據(jù)具體情況摸索實(shí)驗(yàn)條件。
8、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。