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如何配制干粉培養基?
閱讀:126 發布時間:2021-4-13注意事項
1. 干粉不包含的成分,常見的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸鈉、HEPES等。這些成分有些是必須添加的,如NaHCO3、谷氨酰胺,有些根據實驗需要決定。
2. 配制是要保證充分溶解,NaHCO3、谷氨酰胺等物質都要等培養基*溶解之后才能添加。
3. 配制所用的水應是三蒸水,離子濃度很低。
4. 所用器皿應嚴格消毒。
5. 配制好的培養基應馬上過濾,無菌保存于4度。
6. 液體培養基主要是為了科研工作的方便而設計的培養基,它是一種滅菌后保證無菌的溶液,必要時可制成無內毒素等的溶液,可節省科研人員的工作量。
配制方法
1. 在一個盡可能接近總體積的容器中加入比預期培養基總體積少5%的雙蒸水。
2. 在室溫(20℃到30℃)的水中加入干粉培養基,輕輕攪拌,不要加熱。
3. 水洗包裝袋的內部,轉移全部的痕量干粉到容器內。
4. 加NaHCO3到培養基中。
5. 用雙蒸水稀釋到想要的體積,攪拌溶解。注意不要過分攪拌。
6. 通過緩慢攪拌加入1N NaOH 或1N HCL調節pH值,由于pH值在過濾時會上升0.1到0.3,因而調節pH值使它比最終想要的pH值低0.2到0.3。培養基在過濾前要保持密封。