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無外泌體血清制備操作步驟!

閱讀:167          發布時間:2020-10-20

以外泌體為代表的細胞外囊泡是近幾年研究的熱點,目前的外泌體研究主要通過研究體外培養細胞來源的外泌體,分析其在體內外的功能作用。一般的血清FBS中含有供體細胞自然分泌的大量Exosomes,而用于Exosome研究的細胞必須提前更換無外泌體的血清進行培養,以減少對后續實驗結果的污染。

目前市面上存在著商業化的無外泌體血清,然而由于其價格較高等因素,很多研究者選擇自己制備無外泌體血清,而常用的主要是基于超速離心的無外泌體血清分離方法

 

無外泌體血清制備步驟:

1. 根據需要處理的血清體積選擇合適的轉子與超離管。

2. 在超凈工作臺,將普通血清置于超離管中,配平后,進行熱封口。

3. 將封口后的超離管放于離心機轉子中,并加入相應適配器然后擰緊轉頭蓋。

4. 設置離心程序:4℃,120,000 ×g,離心18小時(也有研究者選擇100,000 ×g離心18小時【2】)。

5. 離心結束后,回收上清液,為避免污染,在超凈工作臺操作。

6. 收集得到無外泌體血清,并儲存于-20℃中備用。

無外泌體血清產品特點:

1、專為外泌體研究而設計;

2、無菌采集的健康胎牛血清過濾法去除外泌體;

3、胎牛血清內源外泌體去除率達97%;

4、過濾法可有效保護FBS中重要的細胞營養因子;

5、培養的細胞生長速率與形態與普通FBS無差異。

無外泌體血清是一種可由多種細胞分泌的直徑為30-150nm的膜性小囊泡。經研究后發現,無外泌體血清其內含有*的蛋白質與核酸分子,無外泌體血清所含成份與其細胞來源密切相關,這也決定了無外泌體血清的功能特異性,如抗原提呈、信號傳導或誘導抗腫瘤免疫反應、細胞遷移、細胞分化、細胞間通信、腫瘤轉移等。目前,無外泌體血清研究已經成為臨床診斷與基礎醫生的新熱點。

無外泌體血清關注市場的動向,才可以更好的服務市場,在不斷的挑戰中,追尋夢想,實現自己的價值。無外泌體血清發揮了自己的實力,挑戰自己,追求的道路上,無外泌體血清更多的是堅持不懈的努力,奮發向上的積極。無外泌體血清簡便可靠。專業化知識強,讓無外泌體血清的努力更好的得到了展現,也是在新的時代里,無外泌體血清的付出是值得稱贊的。

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