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實驗材料    組織樣品
試劑、試劑盒    PBS抗體
儀器、耗材    玻片加濕盒
實驗步驟    
1.  將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。
 
2.  待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。
 
3.  稀釋的*杭體于4℃用微量離心機以13 500 g 離心2 min（每一載玻片上加40~50 μl 抗體，應能蓋住切片）。
 
4.  用與泵相連的巴斯德吸管，在切片的一端吸去玻片上的PBS，并從另一端加上抗體，蓋上加濕盒，室溫溫育1 h。

5.  以PBS冼玻片3次（5 min/次），從切片一端加入新的PBS緩沖液，由另一端吸去舊的緩沖液。
 
6.  稀釋的第二抗體于4℃用微量離心機以13 500 g 離心2 min（每載玻片可加40~50 μl 抗體）。
 
7.  將第二抗體加于切片上，置加濕盒中室溫溫育1 h，以PBS洗玻片3次（5 min/次）。
 

圖一、免疫組化標記的各種方法
 
8.  將蓋玻片放于紙巾上，滴加1滴Gelvatol 于蓋玻片*。翻過載玻片放于蓋玻片上（勿施壓），將玻片置工作臺上，用鋁箔覆蓋避光放置30 min，使Gelvatol 凝結。
 
9.  顯微鏡下觀察結果，或置玻片盒中貯于4℃。