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小鼠TNFα檢測試劑盒

產品名稱 TNFα（m） ELISA kit
特異性 系統和其它細胞因子無交叉反應。
檢測標本 血清、體液、組織勻漿或細胞培養上清
檢測范圍 15.6pg/ml→1000pg/ml (細胞培養上清)； 7.8pg/ml→500pg/ml(小鼠血清、血漿等)。
敏感性 ＜1pg/ml
保存條件 4℃六個月，-20℃一年。
小鼠TNFα檢測試劑盒
背景資料 Tumor necrosis factor α，TNFα，腫瘤壞死因子α。TNFα前體是以跨膜蛋白的形式存在于細胞內，在細胞外被剪切成17KDa的成熟形態（157個氨基酸）。活性的TNFα以非共價鍵二聚體、三聚體甚至五聚體的形式存在，但在SDS-PAGE顯示為單一17KDa條帶。很多細胞都能合成TNFα，包括各種免疫細胞（單核細胞、巨噬細胞、T、B細胞、粒細胞、NK細胞）和非免疫細胞（上皮細胞、纖維細胞、肌細胞、Kuppfer細胞等）。TNFα的合成受到很多因素的影響。其功能zui早認為是有抗腫瘤活性，現在已明確不僅能調節腫瘤細胞的生長，對很多細胞的生長、分化和代謝都有影響。TNFα是免疫宿主反應的快速反應因子。其另一特點是在免疫疾病中理性作用。

小鼠TNFα檢測試劑盒標準曲線可以繪成直線或是曲線(二次方程或三次方程)。通常是選取線性比較好的幾個點繪成直線。直線斜率越高說明抗體的特異性及靈敏性好，R2值越靠近1，則說明線性關系好。曲線繪好后，有一些常用的參數，如抑制率、半數抑制、檢測限、定量限、標準偏差、變異系數等等：

  1.抑制率(%)＝1－B/B0(B0為不含藥物的OD值；B為含有藥物的OD值)

  2.標準差(SD)＝[∑(Xi－B)2/(n－1)]1/2；

  3.標準偏差(RSD)＝SD/B

小鼠TNFα檢測試劑盒半數抑制：指用藥物(半抗原)去做競爭實驗時呈現50%抑制效果時的藥物濃度。藥物濃度越低，而抑制率越高，則表示抗體對藥物的特異性越好，靈敏度也高。

  半數抑制濃度IC50對應的OD值：OD IC50＝0.5 B0

  檢測下限(LOD)對應的OD值：ODLOD=B0－3SD；

  定量限(LOQ)對應的OD值：ODLOQ=B0－10SD

間接ELISA操作中具體注意的問題

  間接ELISA一般有6個步驟：小鼠TNFα檢測試劑盒包被抗原、封閉、加一抗(在做競爭時同時加入藥物)、加二抗、顯色、終止。其中除了加顯色和終止外，其余步驟之間都要進行洗板。在這里面，每一步都非常重要，假如有一步疏忽都會造成結果的不準確。通常ELISA結果會出現如空白顯色、陰性偏高、方陣梯度不明顯，還有如何提高間接競爭ELISA靈敏度等問題。