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目標蛋白質(zhì)組(MRMHR)技術

2017-5-3  閱讀(308)

目標蛋白質(zhì)組(MRMHR)技術

MRM(Multiple reaction monitoring作為一種質(zhì)譜檢測的分析方法,具有特異性強、靈敏度高、準確度高、重現(xiàn)性好、線性動態(tài)范圍寬、自動化高通量的突出優(yōu)點,在基于蛋白質(zhì)組學的生物標志物研究、蛋白質(zhì)翻譯后修飾、定量蛋白質(zhì)組和蛋白質(zhì)相互作用等研究領域應用較為廣泛。而MRMHR是一種高分辨率率的MRM,可以在5600-plus儀器上實現(xiàn)。

技術原理

質(zhì)譜多反應監(jiān)測技術(Multiple reaction monitoring,MRM)是一種基于已知信息或假定信息設定質(zhì)譜檢測規(guī)則,對符合規(guī)則的離子進行信號記錄,去除大量不符合規(guī)則離子信號的干擾,從而得到質(zhì)譜信息的一種數(shù)據(jù)獲取方式。對于MRM技術而言關鍵在于首先要能夠檢測到具有特異性的母離子,然后只將選定的特異性母離子進行碰撞誘導(collision-induced),zui后去除其他子離子的干擾,只對選定的特異子離子進行質(zhì)譜信號的采集。

武漢華美生物工程有限公司依據(jù)前人的工作在AB SCIEX5600-plus 儀器上開發(fā)出了MRMHR技術,因為MRMHR采納了高精度的數(shù)據(jù),因此選擇transition更加可信,定量更加準確。


 

 

技術特點

l  靈敏度高:通過兩級離子選擇,排除大量干擾離子,使質(zhì)譜的化學背景降低,目標檢測物的信噪比顯著提高,從而實現(xiàn)檢測的高靈敏度。

l  重現(xiàn)性好:在MRMHR 技術選擇性的質(zhì)譜信號采集中,避免了待測分子離子化、質(zhì)譜信號的抑制及源內(nèi)碰撞碎裂過程的影響,因此重現(xiàn)性也相應提高。

l  準確度高:利用MRMHR技術的特異性,進行連續(xù)增強的離子掃描分析,得到高分辨的串聯(lián)質(zhì)譜(MS/MS)碎片數(shù)據(jù),與全掃描和中性丟失質(zhì)譜掃描模式相比降低了分析過程中定性結(jié)果的假陽性率,保證了分析的準確度。

l  通量高:使用目前的質(zhì)譜系統(tǒng),MRMHR技術每個工作循環(huán)能處理多達300對母離子-子離子對,這種特點為研究多種蛋白質(zhì)的多種修飾和豐度變化提供了機會,更能滿足蛋白質(zhì)組學的研究需求。



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