 |
上海信裕生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： ELISA試劑盒，檢測試劑盒，白介素試劑盒，試劑盒，重組蛋白，單克隆抗體，多克隆抗體，細(xì)胞系，原代細(xì)胞，胎牛血清，生化試劑，實(shí)驗室耗材，abcam抗體等科研產(chǎn)品 |
會員1.png)
|
上海信裕生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： ELISA試劑盒，檢測試劑盒，白介素試劑盒，試劑盒，重組蛋白，單克隆抗體，多克隆抗體，細(xì)胞系，原代細(xì)胞，胎牛血清，生化試劑，實(shí)驗室耗材，abcam抗體等科研產(chǎn)品 |
2017-4-20 閱讀(310)
競爭抑制ELISA對小分子定量檢測的優(yōu)勢
通常意義上來說，小分子是指分子量很小的化合物，一般分子量小于 1000 道爾頓（Dalton，Da）。在生物學(xué)領(lǐng)域，常見的小分子包括：多肽、多糖、氨基 酸、核苷酸等；其中也包括食品安全中涉及的“瘦肉精”、“三聚氰胺”等； 以及醫(yī)學(xué)檢測中的激素等。
由于小分子通常化學(xué)組分單一，化學(xué)結(jié)構(gòu)簡單且分子量小，所以不具備免 疫原的基本化學(xué)特性。因此，小分子直接免疫動物是不能激發(fā)免疫應(yīng)答而獲得 特異性抗體的，常用的免疫學(xué)檢測方法也很難對其進(jìn)行定量檢測?，F(xiàn)有的針對 小分子定量檢測的方法主要為液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC），但是該方法對儀器設(shè)備及樣本性質(zhì)要求高，檢測耗 時較長，因此在一定程度上限制了小分子檢測的發(fā)展。
正由于市場需求與現(xiàn)有檢測方法的限制性不能達(dá)到統(tǒng)一，所以針對小分子 的檢測，我公司基于*的小分子結(jié)構(gòu)改造及偶聯(lián)技術(shù)，研發(fā)了一系列的 ELISA 檢測試劑盒產(chǎn)品。我們首先通過對小分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，然后針對性地對其進(jìn) 行修飾并與特定的蛋白或多糖載體偶聯(lián)，以獲取具有免疫原性的*抗原，此 后再用該抗原免疫動物制備并篩選特異性抗體。由于小分子結(jié)構(gòu)簡單，分子量 小，不具有兩個抗原識別位點(diǎn)，因此不能被兩種抗體同時識別，所以在建立 ELISA 方法的時候很難使用雙抗體夾心法。我們在獲得小分子偶聯(lián)物和特異性 抗體后，選用了競爭抑制法來建立 ELISA 的檢測。
ELISA 檢測法每次實(shí)驗耗時約 2.5 小時，如果每次實(shí)驗使用一個 96 孔酶標(biāo) 板，除去標(biāo)準(zhǔn)曲線使用的 6 個孔，剩余 90 孔均可用于樣本檢測，所以對于每個 樣本的檢測僅需要不到 2 分鐘。對小分子的定量檢測，ELISA 檢測法與常用的 HPLC 檢測比較，其優(yōu)勢見下表。
表 1. HPLC 與 ELISA 定量檢測小分子對比
| 項目 | HPLC | ELISA |
| 樣本體積 | 10-100ul | 50ul |
| 樣本性質(zhì) | 高 | 中 |
| 實(shí)驗時間/樣本 | 30min | < 2min |
| 樣本數(shù)量 | 每管 1 個樣本 | 每塊板 90 個樣本 |
| 儀器價格 | 高 | 中 |
| 檢測價格 | 單個樣品所需費(fèi)用高 | 單個樣品所需費(fèi)用低 |
