本試劑盒采用熒光RT-PCR核酸擴增技術,通過熒光信號的變化檢測犬瘟熱病毒(Canine distemper virus,CDV)RNA,可用于多種樣本(如動物臟器、組織滲出液、淚液、唾液、鼻液、血清或血細胞等)犬瘟熱病毒RNA的檢測。
儲存條件及有效期:試劑盒置于-20℃冰箱中凍存,試劑盒有效期為一年。
產品特點 Features
操作流程 process
犬瘟熱病毒熒光RT-PCR檢測試劑盒操作流程:
1)從試劑盒中取出DEPC水、RT-PCR反應液、P溶液、陰性和陽性對照,室溫融化,酶混合液置-4℃冰箱待用。
2)取待檢樣本(100μL)、陰性和陽性對照(各100μL),用Trizol法或柱法或磁珠法提取RNA,并溶解于25 μL DEPC水中。
3)配反應體系:試劑使用前,振蕩混勻,3000rpm離心2秒。
在0.2mL平蓋PCR薄壁管或平蓋PCR八聯管中,按上述體積加入反應體系液,管好管蓋,去除管中氣泡,并用離心機甩離,確保所有液體都在管底。將PCR 管放入熒光PCR檢測儀中。
4)熒光PCR檢測儀循環條件設定。
產品細節 Details

技術參數 parameter
質控標準:
陰性對照的CT值應等于None;同時性對照的CT值應小于等于30。
否則,此次試驗視為無效。(CT值應以S型曲線拐點的循環數為準)
結果判定:
1)CT值為None的樣本判定為陰性;CT值小于等于35的樣本判定為陽性。
2)CT值大于35的樣本建議重做。重做后CT值為None判定為陰性,否則判定為陽性。
3)對于某些未呈現S型曲線,但本底較高的樣本,應判定為陰性。
實驗案例展示