本試劑盒采用熒光PCR技術,通過熒光信號的變化檢測犬線粒體16S基因的特異性序列。該試劑盒適用于鑒定多種樣本(如犬組織、犬血液、生物試劑、生物材料、生物制品和化妝品等)中是否含有犬源性基因成份。
儲存條件及有效期:試劑盒置于-20℃冰箱中凍存,試劑盒有效期為一年。
產品特點 Features
操作流程 process
犬源性成份鑒定熒光PCR檢測試劑盒操作流程:
1)從試劑盒中取出水、PCR反應液、P溶液、陽性和陰性核酸對照,室溫融化,置冰箱4℃待用。
2)取待檢樣本(50-100μL)用柱法或磁珠法提取DNA,并溶于50μL水中。
3)反應體系配制:試劑使用前,振蕩混勻,3000rpm離心2秒。
在0.2mL平蓋PCR薄壁管或平蓋PCR八聯管中,按上述加樣量配制反應體系液(陽性和陰性對照管同樣配制,待檢DNA溶液換為試劑盒提供的陽性核酸對照和陰性核酸對照,加樣量分別為3μL),蓋好管蓋,去除管中氣泡,并用離心機甩離,確保所有液體都在管底。將PCR 管放入熒光PCR檢測儀中。
4)熒光PCR檢測儀循環條件設定。
產品細節 Details
技術參數 parameter
質控標準:
陰性對照的CT值應等于None;同時陽性對照的CT值應小于30。
否則,此次試驗視為無效。(CT值應以S型曲線拐點的循環數為準)
結果判定:
1)CT值為None的樣本判定為陰性;CT值小于等于38的樣本判定為陽性。
2)CT值大于38的樣本建議重做。重做后CT值為None判定為陰性,否則判定為陽性。
3)對于某些未呈現S型曲線,但本底較高的樣本,應判定為陰性。
實驗案例展示